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應用案例 | QPix 微生物克隆篩選系統，通過降低交叉污染的風險確保無菌
簡介
QPix? 微生物克隆篩選系統采用一流的技術來減少人工或實驗室內的手動重復性任務。它被廣泛用于快速、準確、高效地篩選基因文庫。根據藥品生產質量管理規范（GMP）標準，生物制劑生產的一個關鍵要求是確保無菌以防止交叉污染。本研究旨在證明使用 QPix 420 系統進行自動菌落挑選和鋪板過程中的無菌性。該系統具有多種滅菌功能，包括用于內部消毒的紫外線、挑針清洗站和鹵素燈干燥。這些特性不僅確保符合 GMP 標準，而且通過挑針的可重復使用性提供經濟效益。在每次揀選過程中，挑針都經過多個清洗步驟，在三個洗滌槽中徹底沖洗以去除微生物殘留物，然后通過鹵素干燥進行滅菌。
優勢：
1
確保菌落采集和鋪板過程中的無菌，符合 GMP 標準。
2
體驗經濟可持續的優勢。通過消毒針的可重復使用性，顯著降低使用成本。
3
高通量和準確篩選微生物克隆，提高實驗室效率和生產力。
4
提供應用靈活性，在微生物學領域支持快速篩選。
挑取
方法：
使用表 1 中描述的樣品、菌針類型和消毒程序進行菌落挑選。每個實驗都包括用消毒針接種的對照孔，然后用消毒針接種到另一個孔中（圖 1，紅色孔）。所有目的板（96 孔微孔板）在 37°C 下攪拌培養過夜后都進行了細菌生長分析。這些數據來自多個 QPix 420 系統的驗證研究，根據對照孔（圖 1，分別為綠色和紅色孔）中是否存在有活力的生物樣本，來評估 QPix 消毒循環的效率。
表1
結果：
在不同的 QPix 儀器中，共有 497 個對照孔接種，無交叉污染（表 2）。
表 2
圖 1. 對照孔：45 個，這些孔用先前采摘過菌落的針接種這些孔，將其先放入 1 號終板，并進行消毒程序，再接入 2 號終板
涂布
方法：
QPix 400 系列還能自動將樣品涂布到裝有瓊脂的托盤上。96 孔微孔板中的液體樣品可以轉移至瓊脂表面，從而在 30 分鐘內自動完成多達 96 個樣品的涂布。涂布使用表 3 中列出的參數進行。每次運行采用接種源孔（圖 2，綠色孔）和純 LB 培養基源孔（圖 2，黃色孔）。每次實驗都包括對照區，對照區用之前涂布過生物樣本的針進行消毒，然后用它再次對這個區域用 LB 培養基進行涂布（圖 2，紅色為對照區）。在 37°C 下培養過夜后，對所有目的平板的生長情況進行分析。對照區域中是否存在可存活的生物樣本，來評估 QPix 消毒循環的效率。
表 3
圖 2. 對照區域：8（紅色）。這些區域使用 LB 培養基進行劃線，使用的涂布頭之前曾在接種過的樣品上進行涂布，并進行了消毒程序
結果
對于每臺 QPix 儀器，8 個對照區域共接種 80 個區域，且無檢測到交叉污染（表 4）。
表 4
總結
*的算法有助于快速鑒定和高通量挑選具有所需表型的微生物菌落。優化的菌種特異性挑針確保高效、準確的菌落采集，效率超過 98%。QPix 模塊化系統的多功能性支持微生物學研究的通量擴展，有效消除交叉污染的風險。
QPix 400 系列微生物克隆篩選系統
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